目的 体外分离培养小鼠骨髓树突状细胞（Dendritic Cell，DC）并与白念珠菌共同孵育，研究不同浓度的DC对白念珠菌的吞噬、杀伤作用，并研究随着共孵育时间的延长DC表型的变化及其吞噬、杀伤白念珠菌能力的变化。方法 无菌条件下分离培养C57小鼠骨髓DC；倒置显微镜下观察DC的形态；Cellometer Mini细胞计数仪测定DC生长曲线及细胞直径变化；流式细胞仪检测DC及白念珠菌刺激后DC表面标志物CD11c及其表面分子MHCⅡ、CD40、CD80及CD86的表达；光学显微镜、激光共聚焦显微镜及流式细胞仪测定DC对白念珠菌的吞噬及杀伤作用。结果 体外培养10 d小鼠骨髓DC，倒置显微镜观察可见典型DC形态；随着培养时间的延长，细胞逐渐增大，培养第10天时，细胞直径分布最多的为10.2 μm；生长曲线显示，DC呈倍数增长，第2～9天为细胞对数生长期，第9天左右增殖曲线达到顶峰。培养第10天，未经白念珠菌刺激的DC表面CD11c分子及CD80分子高水平表达，CD40、CD86及MHCⅡ低表达；经白念珠菌刺激后，DC表面CD11c分子、CD80、CD40、CD86及MHCⅡ均高表达，呈成熟DC表型。激光共聚焦（Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM）及流式细胞仪（Flow Cytometer，FCM）检测DC对白念珠菌吞噬作用，当DC与白念珠菌的比例为1：1时，随着共培养时间的延长（30 min～1.5 h），吞噬率无明显变化（P=0.063）；当DC与白念珠菌比例为2：1、1：2及1：4，随着DC细胞所占比例的减小，DC细胞吞噬作用增强，当比例为1：4时，DC吞噬作用最强，且随着共培养时间的延长（30 min～1.5 h），吞噬率也明显上升，差异有统计学意义（P=0.003；P=0.002；P=0.002）。显微镜检测DC对白念珠菌杀伤率，可见随着时间的延长，各实验组的杀伤率下降（P=0.000）；当DC：白念珠菌=1：1时，较2：1时，杀伤率明显下降，但随着白念珠菌比例在一定范围内的增高（从1：1到1：4），杀伤率明显增高，差异有统计学意义（P=0.000）。结论 小鼠骨髓细胞体外经GM-CSF诱导可培养DC具有较高的纯度，呈未成熟细胞表型；且每只C57小鼠可获得3×107总数的细胞，可满足一些实验的DC用量。经白念珠菌刺激后DC表型成熟；在一定的比率范围内，DC对白念珠菌有较强的吞噬及杀伤作用，其吞噬作用随着DC与白念珠菌比例的减小而增强。且随着两者作用时间的延长，DC对白念珠菌的吞噬作用逐渐增强而杀伤作用逐渐减弱。
