白念珠菌CaCSC1基因的敲除和功能研究

中国真菌学杂志　 2017, Vol. 12 　Issue (3): 144-147.

白念珠菌CaCSC1基因的敲除和功能研究

杨益, 王亚楠, 蒋伶活

江南大学生物工程学院粮食发酵工艺与技术国家工程实验室, 无锡 214122

收稿日期:2017-01-20 出版日期:2017-06-28 发布日期:2017-06-28
通讯作者: 蒋伶活,E-mail:linghuojiang@jiangnan.edu.cn E-mail:linghuojiang@jiangnan.edu.cn
作者简介:杨益,男(汉族),硕士研究生在读.E-mail:554640517@qq.com
基金资助:
国家自然科学基金（81371784，81571966）

Disruption and Functions of CaCSC1 in Candida albicans

YANG Yi, WANG Ya-nan, JIANG Ling-huo

School of Biotechnology, the National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China

Received:2017-01-20 Online:2017-06-28 Published:2017-06-28

摘要/Abstract

摘要：

目的构建白念珠菌CaCSC1基因的基因缺失株，并初步探究它的功能。方法设计长引物，通过PCR直接扩增出带有SAT1 flipper的CaCSC1基因敲除盒，转化到野生型白念珠菌菌株CAI4，并通过PCR鉴定出基因型正确的转化子，得到CaCSC1的基因缺失株。最后，通过倍比稀释的方法进行表型筛选。结果成功得到CaCSC1基因的缺失菌株。基因缺失菌株对酮康唑（Ketoconazole）敏感，对Zn²⁺、Mn²⁺和荧光增白剂（Calcofluor white）表现出耐受性。结论 CaCsc1蛋白参与对锌离子和锰离子的稳态调控，和细胞膜和细胞壁的完整性也相关。

关键词: 白念珠菌, CaCSC1基因, 基因敲除, 离子稳态

Abstract:

Objective To construct deletion mutants for Candida albicans CaCSC1 and explore its functions.Methods The CaCSC1 knockout cassette containing the SAT1 flipper was PCR amplified using a pair of long primers.The cassette DNA was transformed into the wild type CAI4 strain,and genotypes of correct mutant strains were confirmed by PCR.Phenotypes of gene deletion mutants were screened by serial dilution assay.Results Gene deletion mutants of CaCSC1 were successfully constructed.Deletion mutants of CaCSC1 were sensitive to ketoconazole and tolerant against Zn²⁺,Mn²⁺ and Calcofluor white.Conclusions CaCsc1 participates in the regulation of zinc and magnesium homeostasis as well as plasma membrane and cell wall integrity in Candida albicans.

Key words: Candida albicans, CaCSC1, gene knockout, ion homeostasis

中图分类号:

R379.4

杨益, 王亚楠, 蒋伶活. 白念珠菌CaCSC1基因的敲除和功能研究[J]. 中国真菌学杂志, 2017, 12(3): 144-147.

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