烟曲霉极性因子kipA基因的敲除与鉴定

中国真菌学杂志　 2015, Vol. 10 　Issue (6): 332-335.

烟曲霉极性因子kipA基因的敲除与鉴定

朱均昊¹, 李莉¹, 章强强¹, 陈裕充²

1. 复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室, 上海 200040;
2. 上海市皮肤病医院皮肤外科, 上海 200050

收稿日期:2015-10-19 出版日期:2015-12-28 发布日期:2015-12-28
通讯作者: 陈裕充,E-mail:973309637@qq.com E-mail:973309637@qq.com
作者简介:朱均昊,男(汉族),本科,技师.E-mail:gustav2001@msn.com
基金资助:
国家自然科学基金(81271762),高等学校博士学科点专项科研基金新教师类课题(20120071120069)

Identification and knocking-out of polarized growth factor gene kipA in Aspergillus fumigates

ZHU Jun-hao¹, LI Li¹, ZHANG Qiang-qiang¹, CHEN Yu-chong²

1. The Lab of Medical Mycology, Department of Dermatology, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040;
2. Dermatologic Surgery, Shanghai Dermatology Hospital, Shanghai 200050

Received:2015-10-19 Online:2015-12-28 Published:2015-12-28

摘要/Abstract

摘要：

目的构建烟曲霉kipA基因突变株。方法通过In-Fusion技术将kipA基因的上下游基因与抗性基因顺序链接,以潮霉素抗性基因替换靶基因,达到用同源重组手段敲除烟曲霉kipA基因的目的,以realtime-PCR对基因突变株进行鉴定和验证。结果 RT-PCR结果显示,成功构建烟曲霉kipA基因突变株。结论烟曲霉kipA基因突变株的构建,为后续烟曲霉极性生长与血管侵袭性的研究提供了实验基础。

关键词: 烟曲霉, kipA基因, 极性生长

Abstract:

Objective To construct the kipA mutant strain.Methods The vector containing upper and downstream genes of kipA linked with hygromycin resistance gene in the middle was constrctied via In-Fusion assembly.The kipA gene of Aspergillus fumigatu was replaced with hygromycin resistance gene via the method of homologous recombination.The mutant strain was identified and validated by realtime-PCR.Results The kipA deletion strains were successfully constructed.Conclusions Successful construction of kipA mutant strain would provide the foundation for the research of polarized growth and vascular invasion of Aspergillus fumigatus.

Key words: Aspergillus fumigatus, kipA gene, polarized growth

中图分类号:

R379.6

朱均昊, 李莉, 章强强, 陈裕充. 烟曲霉极性因子kipA基因的敲除与鉴定[J]. 中国真菌学杂志, 2015, 10(6): 332-335.

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