LC-MS/MS分析人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量

中国真菌学杂志　 2014, Vol. 9 　Issue (5): 268-271.

LC-MS/MS分析人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量

沈亮亮, 韩禹, 郑建锋, 赵敬军

同济大学附属同济医院皮肤科, 上海 200065

收稿日期:2014-09-01 出版日期:2014-10-28 发布日期:2014-10-28
通讯作者: 赵敬军, E-mail:zhaomyco@163.com E-mail:zhaomyco@163.com
作者简介:沈亮亮, 男 (汉族), 硕士, 主治医师.E-mail:shenliangliang8@126.com

Using LC-MS/MS for determination of Gliotoxin in vitro model of human bronchial epithelial infected by Aspergillus fumigatus

SHEN Liang-liang, Han yu, Zheng Jian-feng, Zhao Jing-jun

Department of Dermatology, Tongji Hospital, Tongji University, Shanghai 200065

Received:2014-09-01 Online:2014-10-28 Published:2014-10-28

摘要/Abstract

摘要： 目的采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS)分析人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量.方法建立人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型并于不同时间段检测共培养模型中胶霉毒素的含量.以支气管上皮细胞单独培养为对照组,分别于12 h、24 h、36 h收集对照组、AF293 (烟曲霉标准株)共培养组、AF B5233 WT (烟曲霉野生株)及AF B5233 ΔGlip (烟曲霉胶霉毒素基因敲除株)共培养组细胞培养上清液,采用LC-MS/MS检测胶霉毒素的含量.结果共培养模型中胶霉毒素水平随培养时间增加而逐渐升高 (P<0.05),胶霉毒素回收率为68.7%~72.6%.结论该方法快速、灵敏、结果准确,适用于测定人支气管上皮细胞与烟曲霉共培养模型中胶霉毒素的含量.

关键词: 人支气管上皮细胞, 烟曲霉, 胶霉毒素, LC-MS/MS, 含量测定

Abstract: Objectives To establish a LC-MS/MS method for the in vitro determination of Gliotoxin (GT) in co-culture model of human bronchial epithelial (HBE) infected by Aspergillus fumigatus (AF).Methods Developing co-cultured model of HBE infected by AF,the concentration of GT were detected by LC-MS/MS in different periods.Results The GT concentration of supernatant from co-culture increased over time (P<0.05) and the recovery of GT was 68.7%-72.6%.Conclusion This method is sensitive, simple and accurate, and suitable for the determination of GT in the co-culture model.

Key words: human bronchial epithelial cell, Aspergillus fumigatus, glioxin, LC-MS/MS, determination

中图分类号:

R379.6

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